A Pseudotrombocitopenia dependente de ?cido etilenodiaminotetrac¨¦tico (EDTA-PTCP) ¨¦ um artefato laboratorial que pode levar a uma avalia??o incorreta e ao tratamento desnecess¨¢rio dos pacientes.

?

Quais dos seguintes m¨¦todos voc¨º usaria para corrigir a contagem de plaquetas em caso de agrega??o plaquet¨¢ria induzida por EDTA na trombocitopenia?

• Verifica??o do esfrega?o sangu¨ªneo e contagem de plaquetas
  
• Verifica??o com adi??o de amicacina
  
• Verifica??o ap¨®s o aquecimento a 37 ¡ãC
  
• Verifica??o sem adi??o de anticoagulante
  
• Repeti??o em outro dispositivo de hematologia
  
• Verifica??o com outros anticoagulantes
  ?

M¨¦dicos profissionais de laborat¨®rio cl¨ªnico buscam precis?o e verdade com o mais alto senso de responsabilidade. Atualmente, alguns estudos cl¨ªnicos foram conduzidos para explorar solu??es de EDTA-PTCP e sugerem que os sistemas de hematologia da Mindray com a tecnologia SF Cube seriam uma op??o para auxiliar os t¨¦cnicos de laborat¨®rio na contagem correta de plaquetas.

Caso cl¨ªnico

Esta paciente ¨¦ uma mulher de 32 anos com infertilidade. Depois que o sangue anticoagulado com EDTA da paciente foi coletado, a amostra foi analisada em cinquenta e cinco minutos e mostrou uma baixa contagem de plaquetas (28 ¡Á 10⁹/L). O teste foi feito pelo m¨¦todo de imped?ncia (PLT-I) em um sistema de hematologia de marca popular (dispositivo A). A agrega??o plaquet¨¢ria foi confirmada por exame microsc¨®pico do esfrega?o, indicando pseudotrombocitopenia (PTCP). Pouco depois, um re-exame desta amostra foi feito usando o m¨¦todo CDR (PLT-O) no equipamento da Mindray BC-6800Plus. Os resultados mostraram uma contagem de plaquetas evidentemente maior com um valor de 180 ¡Á 10⁹/L.

Suspeitou-se que a baixa contagem de plaquetas obtida pelo dispositivo A foi devido ao PTCP induzido por EDTA. Assim, foi solicitado a paciente seu consentimento para um teste adicional usando um tubo de amostra de sangue com citrato de s¨®dio desta vez. A an¨¢lise foi realizada trinta minutos ap¨®s a coleta da amostra. Os par?metros de plaquetas resultantes das amostras de sangue executados por meio de v¨¢rios m¨¦todos de teste e dispositivos est?o listados na Tabela 1.

Compara??o adicional de outras amostras

Sob avalia??o microsc¨®pica do esfrega?o de sangue anticoagulado com EDTAa agrega??o plaquet¨¢ria foi encontrada, enquanto no sangue anticoagulado com citrato de s¨®dio o mesmo n?o foi identificado. As amostras de sangue foram analisadas em at¨¦ quatro horas a partir do momento da coleta, de acordo com as instru??es do fabricante. Al¨¦m desse paciente, foram coletados e avaliados os dados de mais cinco casos de EDTA-PTCP (Tabela 2).

No final, o autor conclui: Em pacientes com EDTA-PTCP conhecida ou suspeita, a tecnologia Mindray SF-Cube ¨¦ uma maneira direta e eficaz de determinar a contagem de plaquetas no sangue anticoagulado com EDTA.

Identifica??o e caracter¨ªsticas das amostras de EDTA-PTCP

As amostras que acionaram o flag ¡°agrega??o PLT¡± no analisador de hematologia mostraram uma irregularidade serrilhada t¨ªpica e uma cauda em zigue-zague (Figura 1) no histograma de plaquetas. Al¨¦m disso, na avalia??o microsc¨®pica, a presen?a de satelitismo plaquet¨¢rio, ou plaquetas gigantes, n?o foi observada.

Baixas contagens de plaquetas esp¨²rias no BC-6800 por contagem ¨®ptica de plaquetas (PLT-O)

?

Vinte e tr¨ºs amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA (com agrega??o plaquet¨¢ria) foram testadas na imped?ncia (PLT-I (EDTA)) e no canal de reticul¨®citos do Mindray BC-6800 (PLT-O (EDTA)). Curiosamente, os resultados do PLT-O (EDTA) foram compar¨¢veis ¨¤s contagens de plaquetas das amostras recoletadas em tubos de citrato (PLT-I (Citrato)), o que prova que o m¨¦todo PLT-O (EDTA) pode ajustar a contagem plaquet¨¢ria causada pelo EDTA com precis?o (Figura 2).

Efeito de dissocia??o EDTA-PTCP do sistema de hematologia de uma marca principal:Dispon¨ªvel com colora??o fluorescente?

A contagem ¨®ptica de plaquetas por fluoresc¨ºncia est¨¢ dispon¨ªvel em analisadores hematol¨®gicos de ¨²ltima gera??o (dispositivo B) e nos analisadores hematol¨®gicos Mindray BC-6000. Neste m¨¦todo, um corante fluorescente ¨¦ usado para tingir os ¨¢cidos nucleicos nas plaquetas, permitindo o reconhecimento de plaquetas grandes e excluindo part¨ªculas n?o plaquet¨¢rias, como restos de eritr¨®citos, micro eritr¨®citos ou fragmentos de leuc¨®citos.

Para verificar se o efeito de dissocia??o da contagem de plaquetas de fluoresc¨ºncia ¨®ptica era dependente da colora??o com corante fluorescente, 17 daquelas 23 amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA tamb¨¦m foram testadas no canal de reticul¨®cito e canal de imped?ncia do dispositivo B. Nenhuma diferen?a significante foi observada entre a contagem de plaquetas do canal de reticul¨®citos e do canal de imped?ncia (Figura 3). Apenas uma das 17 amostras de EDTA-PTCP mostrou uma taxa de dissocia??o de mais de 80%, com uma taxa de dissocia??o m¨¦dia de 56% entre todas as 17 amostras de EDTA-PTCP (Figura 3).

Conclus?o

Em resumo, o autor conclui: A contagem de plaquetas por fluoresc¨ºncia ¨®ptica do analisador de hematologia BC-6800 ¨¦ eficaz para a corre??o de contagens baixas de plaquetas esp¨²rias em pacientes com EDTA-PTCP e seu efeito de dissocia??o em amostras de EDTA-PTCP ¨¦ independente da colora??o com corante fluorescente.

?

No intenso trabalho di¨¢rio do laborat¨®rio, o PTCP ¨¦ um problema inevit¨¢vel. A tecnologia Mindray SF Cube fornece a medi?? de PLT-O (com base na colora??o fluorescente de ¨¢cido nucleico e feito no canal RET) para corrigir contagens de PLT quando h¨¢ redu??o de pseudoplaquetas devido ao EDTA. O PLT-O est¨¢ dispon¨ªvel no Analisador de hematologia autom¨¢tica Mindray BC-6000 Series e na linha de an¨¢lise celular CAL 8000/6000.

Refer¨ºncias:

[1] J. Deng, et al. Tecnologia Mindray SF-Cube: Uma maneira eficaz de corrigir a contagem de plaquetas em indiv¨ªduos com pseudo trombocitopenia dependente de EDTA. Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99¨C101

[2] Y. Bao, et al. Corre??o de contagens de plaquetas baixas esp¨²rias por contagem de plaquetas de fluoresc¨ºncia ¨®ptica do analisador de hematologia BC-6800 em pacientes com pseudo trombocitopenia dependentes de EDTA. Transl Cancer Res 2020; 9 (1): 166-172

?

?