A pseudotrombocitopenia dependente de EDTA (EDTA-PTCP) induzida por anticoagulantes com EDTA ¨¦ um fen?meno laboratorial comum. ? causada pela agrega??o plaquet¨¢ria (PLT) in vitro e pode levar a um resultado de plaquetas baixas e, em ¨²ltima an¨¢lise, a um diagn¨®stico e tratamento m¨¦dico incorretos para o paciente.

?

No cap¨ªtulo anterior?( As hist¨®rias de agrega??o plaquet¨¢ria),?examinamos dois casos cl¨ªnicos que inicialmente tinham resultados incorretos de plaquetas baixas usando o princ¨ªpio de medi??o tradicional de PLT. Depois de repetir as amostras no analisador de hematologia Mindray usando o modo RET, o PLT-O mostrou um resultado mais confi¨¢vel e finalmente deu um diagn¨®stico correto.

?

Agora, vamos explorar como a solu??o da Mindray resolve o problema de agrega??o plaquet¨¢ria in vitro.

Quais s?o os fatores cr¨ªticos da agrega??o plaquet¨¢ria in vitro?

Durante a agrega??o de PLT, a PLT tem tr¨ºs est¨¢gios: PLT inativada, PLT ativada e PLT agregada. A ativa??o de PLT ¨¦ a etapa mais cr¨ªtica para a agrega??o de PLT.^[1]

Assim, o problema de agrega??o de PLT pode ser resolvido bloqueando o processo de ativa??o de PLT. A fim de descobrir o mecanismo de ativa??o da PLT, realizamos uma explora??o adicional na estrutura subcelular e na via de sinaliza??o celular, e descobrimos que havia tr¨ºs vias regulat¨®rias principais durante a ativa??o da PLT: a via do c¨¢lcio, a via da tiosina quinases e a via da glicoprote¨ªna GPIIb/IIIa.^[2]

?

Al¨¦m disso, a pesquisa do antagonista do receptor correspondente foi realizada para bloquear a via regulat¨®ria a fim de atingir o objetivo de desagrega??o de PLT. V¨¢rios tipos de antagonistas do receptor foram testados e mostraram funcionar bem no bloqueio da agrega??o de PLT.

Fibrinog¨ºnio e outros marcadores

Sem antagonista do receptor (2 PLT se re¨²nem)

Bloqueio de receptor

Com antagonista do receptor (n?o ¨¦ poss¨ªvel agregar com sucesso)

?

Conforme os dados mostrados abaixo, a adi??o de antagonistas em amostras com receptores sens¨ªveis a eles antes da agrega??o pode evitar que o agregado aconte?a; adicionar antagonistas ap¨®s a agrega??o pode realizar a desagrega??o de PLT tamb¨¦m.

No entanto, ap¨®s testar diferentes tipos de amostras, ainda existem algumas amostras que n?o s?o sens¨ªveis a esses antagonistas. Isso ocorre porque esses antagonistas podem ter como alvo apenas uma via regulat¨®ria ¨²nica e t¨ºm um efeito limitado nas outras duas vias.

?

Um estudo adicional foi feito combinando o m¨¦todo de biologia molecular para explorar o mecanismo molecular e as diferentes caracter¨ªsticas d grupo radical. Em ¨²ltima an¨¢lise, a partir de milhares de compostos qu¨ªmicos potenciais, uma s¨¦rie de compostos ideais foi encontrada, os quais cont¨ºm grupos de radicais espec¨ªficos que s?o altamente eficientes no bloqueio das tr¨ºs vias regulat¨®rias.

A fim de comprovar ainda mais seus efeitos na desagrega??o de PLT usando esses antagonistas, uma experi¨ºncia de compara??o foi realizada entre o grupo de controle e o grupo onde os antagonistas foram bloqueados. Os resultados da experi¨ºncia s?o mostrados abaixo:

A partir da experi¨ºncia, descobrimos que os antagonistas que cont¨ºm grupos de radicais espec¨ªficos t¨ºm um efeito ¨®bvio na desagrega??o das plaquetas.

?

Al¨¦m disso, existem tamb¨¦m tr¨ºs fatores cr¨ªticos (pH, temperatura e mistura mec?nica apropriados) que aumentam a desagrega??o do PLT. O efeito de superposi??o desses fatores na desagrega??o ¨¦ ¨®bvio. Gra?as aos efeitos conjuntos de v¨¢rios fatores, as plaquetas de agrega??o s?o desagregadas e um valor plaquet¨¢rio confi¨¢vel ¨¦ obtido.

?

A fun??o de desagrega??o de PLT foi usada no BC-6800, BC-6200, BC-6800Plus, CAL 6000 e CAL 8000 no modo RET. Clique?aqui?para saber mais sobre os produtos.

Refer¨ºncias:

[1] The Platelet Membrane Glycoprotein IIb / III§Ñ Complex, David R. Phillips, etc., Anais da New York Academy of Science (509), 177-187
[2] Ilya Reviakine. New horizons in platelet research: Understanding and harnessing platelet functional diversity[J]. Clinical Hemorheology and Microcirculation, 2015, 60: 133-152