La pseudotrombocitopenia inducida por ¨¢cido etilendiaminotetraac¨¦tico: (EDTA-PTCP) es un ¡°artefacto¡±, de laboratorio que puede provocar una evaluaci¨®n incorrecta y un tratamiento innecesario de los pacientes.

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?Cu¨¢l de los siguientes m¨¦todos (o m¨¦todos) utilizar¨ªa para corregir los recuentos de plaquetas en caso de una agregaci¨®n plaquetaria inducida por EDTA en la trombocitopenia?

• Reanalizar con un frotis de sangre y estimar el recuento de plaquetas
  
• Reanalizar con la adici¨®n de amikacina
  
• Reanalizar despu¨¦s de calentar a 37 ¡ãC
  
• Reanalizar inmediatamente la diluci¨®n sin anticoagulante
  
• Reanalizar en otro analizador hematol¨®gico
  
• Reanalizar con otros anticoagulantes

Los profesionales que trabajan en laboratorios cl¨ªnicos buscan la precisi¨®n y la veracidad de resultados con el mayor sentido de responsabilidad. Se han realizado recientemente algunos estudios cl¨ªnicos para explorar las soluciones EDTA-PTCP, y se sugiere que los sistemas de hematolog¨ªa Mindray con tecnolog¨ªa SF Cube ser¨ªan una opci¨®n para ayudar eficazmente a los t¨¦cnicos de laboratorio a identificar los recuentos plaquetarios correctos.

Informe de un caso cl¨ªnico

La paciente es una mujer de 32 a?os con infertilidad. Despu¨¦s de extraer la sangre en un tubo con anticuagualante EDTA, se analiz¨® dentro de los 55 minutos y mostr¨® un recuento plaquetario bajo (28 ¡Á 10⁹/L). La prueba se realiz¨® mediante el m¨¦todo de impedancia (PLT-I) en un sistema de hematolog¨ªa de una marca conocida (aparato A). La agregaci¨®n plaquetaria se confirm¨® mediante examen microsc¨®pico del frotis, que indicaba pseudotrombocitopenia (PTCP). Poco despu¨¦s, se realiz¨® un nuevo an¨¢lisis de esta muestra utilizando el m¨¦todo CDR (PLT-O) en el Mindray BC-6800Plus. Los resultados mostraron un recuento de plaquetas marcadamente m¨¢s alto con un valor de 180 ¡Á 10⁹/L.

Se sospecha que el bajo recuento plaquetario obtenido en el aparato A se debi¨® a agregaci¨®n plaquetaria inducida por EDTA. A continuaci¨®n, se le pidi¨® a la paciente que autorizara un an¨¢lsis adicional utilizando esta vez un tubo de ensayo de sangre con citrato de sodio. La muestra se analiz¨® treinta minutos despu¨¦s de la extracci¨®n. En la Tabla 1 se indican los par¨¢metros plaquetarios resultantes de las muestras de sangre analizadas mediante varios m¨¦todos y aparatos de an¨¢lisis.

Comparaci¨®n adicional de otras muestras

Bajo la evaluaci¨®n microsc¨®pica del frotis de sangre, la sangre anticoagulada con EDTA mostr¨® agregaci¨®n plaquetaria mientras que la sangre anticoagulada con citrato de sodio no mostr¨® ninguna. Las muestras de sangre se analizaron dentro de las cuatro horas de la extracci¨®n, de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Adem¨¢s de esa paciente, se recopilaron y evaluaron los datos de cinco casos adicionales de EDTA-PTCP (Tabla 2).

Al final, el autor concluye: En pacientes con EDTA-PTCP conocida o sospechada, la tecnolog¨ªa Mindray SF-Cube es una forma sencilla y eficaz de determinar el recuento de plaquetas en sangre anticoagulada con EDTA.

Identificaci¨®n y caracter¨ªsticas de las muestras de EDTA-PTCP

Las muestras que activaron el indicador de ¡°agregaci¨®n PLT¡± en el analizador de hematolog¨ªa mostraron una irregularidad dentada t¨ªpica y una cola en zigzag (Figura 1) en el histograma plaquetario. Adem¨¢s, bajo evaluaci¨®n microsc¨®pica, no se observa la presencia de satelitismo plaquetario o plaquetas gigantes.

Bajo recuento plaquetario err¨®neo mediante recuento de plaquetas ¨®ptico (PLT-O) en el BC-6800

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Se analizaron 23 muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA (con agregaci¨®n plaquetaria) en los canales de impedancia (PLT-I [EDTA]) y de reticulocitos del Mindray BC-6800 (PLT-O [EDTA]). Curiosamente, los resultados de PLT-O (EDTA) fueron comparables a los recuentos de plaquetas de las muestras recogidas en tubos de citrato (PLT-I [Citrato]), lo que demuestra que el m¨¦todo PLT-O (EDTA) puede ajustarse con precisi¨®n para el problema de agregaci¨®n plaquetaria causado por EDTA (Figura 2).

Efecto de disociaci¨®n EDTA-PTCP en el sistema hematol¨®gico de una conocida marca:?Disponible con tinci¨®n fluorescente?

El recuento de plaquetas por fluorescencia ¨®ptica est¨¢ disponible tanto en analizadores de hematolog¨ªa de gama alta (aparato B) como en los analizadores de hematolog¨ªa de la serie Mindray BC-6000. En este m¨¦todo, se usa una tinci¨®n fluorescente para te?ir los ¨¢cidos nucleicos en las plaquetas, lo que permite el reconocimiento de plaquetas grandes y excluye las part¨ªculas que no son plaquetas, como restos de eritrocitos, microeritrocitos o leucocitos.

Para verificar si el efecto de disociaci¨®n del recuento de plaquetas de fluorescencia ¨®ptica depend¨ªa de la tinci¨®n con colorante fluorescente, 17 de esas 23 muestras de EDTA-PTCP en tubos de EDTA tambi¨¦n se probaron en el canal de reticulocitos y el canal de impedancia del aparato B. No se encontr¨® diferencia entre los recuentos plaquetarios del canal de reticulocitos y el canal de impedancia (Figura 3). Solo una de las 17 muestras de EDTA-PTCP mostr¨® una tasa de disociaci¨®n de m¨¢s del 80?%, con una tasa de disociaci¨®n promedio del 56?% entre las 17 muestras de EDTA-PTCP (Figura 3).

Conclusi¨®n

El autor concluye, en resumen: El recuento de plaquetas mediante fluorescencia ¨®ptica del analizador hematol¨®gico BC-6800 es eficaz para la correcci¨®n de falsos recuentos plaquetarios bajos en pacientes con EDTA-PTCP, y su efecto de disociaci¨®n en muestras de EDTA-PTCP es independiente de la tinci¨®n con colorante fluorescente.

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En el trabajo diario del laboratorio, la aparici¨®n de la pseudotrombocitopenia (PTCP) es un problema inevitable. La tecnolog¨ªa Mindray SF Cube proporciona mediciones de PLT-O (basado en tinci¨®n fluorescente de ¨¢cido nucleico y efectuadas en el canal RET) para corregir los recuentos de PLT cuando hay una pseudorreducci¨®n de plaquetas debida a EDTA. PLT-O est¨¢ disponible en el analizador autom¨¢tico de hematolog¨ªa de la serie BC-6000 de Mindray y en la l¨ªnea de an¨¢lisis histol¨®gico CAL 8000/6000.

Referencias:

[1] J. Deng, et al. Mindray SF-Cube technology: An effective way for correcting platelet count in individuals with EDTA dependent pseudo thrombocytopenia. Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99¨C101

[2] Y. Bao, et al. Correction of spurious low platelet counts by optical fluorescence platelet counting of BC-6800 hematology analyzer in EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia patients. Transl Cancer Res 2020;9(1):166-172