HbA1c zosta?a po raz pierwszy wyizolowana w 1958 r. i szybko sta?a si? podstawowym testem do bada¨½ przesiewowych i diagnostyk icukrzycy oraz do monitorowania terapii. Jest standardowym narz?dziem w praktyce klinicznej, ze wzgl?du na wiele zalet, takich jak: brak konieczno?ci wykonywania badania na czczo, ?atwo?? stosowania i zdolno?? do odzwierciedlenia kontroli glikemii w okresie 3-4 miesi?cy.

Interferencje wywo?ywane przez warianty hemoglobiny

Grupa robocza IFCC zdefiniowa?a HbA1c jako Hb, kt¨®ra uleg?a nieodwracalnemu glikowaniu przy jednej lub obu walinach na ko¨½cu N w ?a¨½cuchach beta^[1]. Cz?sto obserwowane warianty hemoglobiny, takie jak HbS, HbC, HbE i HbD, posiadaj? jedno podstawienie aminokwasu w ?a¨½cuchach beta. Nast?pnie ka?dy z tych wariant¨®w hemoglobiny, zale?nie od u?ytej metody, mo?e powodowa? niedok?adny wynik HbA1c ze wzgl?du na interferencje analityczne. To z kolei mo?e dawa? warto?? HbA1c, kt¨®ra wprowadza w b??d pod wzgl?dem klinicznym z uwagi na zmienne biologiczne wp?ywaj?ce na interpretacj? wyniku.

Oznaczenie HbA1c firmy Mindray

Spo?r¨®d wszystkich metod badania HbA1c firma Mindray wybra?a metod? enzymatyczn? ze wzgl?du na zalety tej metodyki. Jedn? z nich jest zapobieganie interferencjom w odniesieniu do wariant¨®w hemoglobiny.

?

W przypadku metody enzymatycznej, pr¨®bki krwi pe?nej s? poddawane lizie oraz intensywnemu trawieniu proteolitycznemu. Proces ten powoduje uwolnienie aminokwas¨®w, szczeg¨®lnie glikowanych N-ko¨½cowych aminokwas¨®w z ?a¨½cuch¨®w beta hemoglobiny. Sygna? wytwarzany przez glikowane N-ko¨½cowe aminokwasy w nast?pczej reakcji chromogenicznej jest wykorzystywany do obliczenia HbA1c. Obecno?? wariant¨®w Hb nie ma analitycznego wp?ywu na t? metod?.^[4]

W?a?ciwo?ci testu enzymatycznego do oznaczania HbA1c, kt¨®re zapobiegaj? interferencjom

W celu udowodnienia zdolno?ci do zapobiegania interferencjom przeprowadzili?my wewn?trzne badania. Pr¨®bki pobrano w Queen Beatrix Medical Center w Holandii, w kt¨®rym mie?ci si? europejskie laboratorium referencyjne dla hemoglobiny glikowanej oraz g?¨®wne laboratoria referencyjne do standaryzacji HbA1c. Warto?ci HbA1c zosta?y przypisane przez skalibrowany przez IFCC aparat do chromatografii powinowactwa. Zawarto?? procentow? HbS, HbC, HbE i HbD przypisano na podstawie elektroforezy kapilarnej i HPLC jonowymiennej. Pomiar HbA1c (NGSP%) wykonywano na analizatorze chemicznym BS-800M. Nie stwierdzono istotnego b??du systematycznego interferencji (tj. powy?ej ¡À 5,0%) dla HbS, HbC, HbE i HbD. Dane testowane przez Mindray i warto?? docelowa przypisana przez g?¨®wne europejskie laboratoria referencyjne zosta?y przeanalizowane i przedstawione w poni?szej tabeli i na wykresach:

Podsumowanie

Badania HbA1c, jako podstawowego wska?nika zalecanego przez r¨®?ne wytyczne maj? du?e znaczenie w ocenie przesiewowej, diagnostyce i monitorowaniu pod k?tem cukrzycy. Warianty Hb, zw?aszcza cztery najcz?stsze warianty na ?wiecie (HbS, HbC, HbE i HbD) mog? zak?¨®ca? wynik oznaczenia HbA1c. Metoda enzymatyczna systemu do analiz chemicznych serii BS firmy Mindray mo?e skutecznie zapobiega? interferencjom wywo?anym przez te warianty.

Pi?miennictwo:

[1]?Witryna internetowa NGSP: IFCC Reference System
[2] Edwards, R. L., Martin, N. J. & Cooper, H. J. Hemoglobin variant analysis of whole blood and dried blood spots by MS. Bioanalysis 5, 2043¨C2052 (2013).
[3] Tosoh Europe N.V.: Haemoglobinopathies - Pathology
[4] Rhea, J. M. & Molinaro, R. Pathology Consultation on HbA1c Methods and Interferences. American Journal of Clinical Pathology 141, 5¨C16 (2014).